Prostatita și cum să o lizezi. Dus de contrast bun pentru prostatita


Subiecte Abstract Inflamația cronică crește riscul de cancer și multe tipuri de cancer, inclusiv cancerul de prostată, apar la locurile de inflamație cronică. Sindaza inductibil oxid de azot iNOS este o enzima exprimata in mod dominant in timpul reactiilor inflamatorii. Deși sinteza cantităților mari de oxid nitric NO prin iNOS a fost demonstrată în procesele patofiziologice, cum ar fi inflamația acută sau cronică, bolile autoimune sau tumorigeneza, rolul activității iNOS în majoritatea acestor boli este slab înțeleasă.

Analizând biopsiile de cancer de prostată prin imunohistochimie, am găsit expresia proteinei iNOS în celulele tumorale puternic paralele cu nitrotirozina, sugerând că iNOS este pe deplin activă.

In vitro, NO inhibă activitatea promotorului dependent de receptorul androgen și producerea de antigen specific prostatei, precum și activitatea de legare a ADN a receptorului androgen AR într-o manieră dependentă de concentrație. Inhibarea activității constructorilor reporter dependenți de receptorul androgen nu este nici datorită nivelurilor scăzute ale proteinei AR, nici datorită inhibării importului său nuclear. În plus, NO inhibă proliferarea celulelor cancerigene de prostată pozitive ce provoacă durere cu prostatita receptorul androgen semnificativ mai eficient decât proliferarea celulelor cancerigene de prostată cu receptorul androgen-negativ.

In prostatita și cum să o lizezi, descoperirile noastre sugereaza ca activitatea iNOS intratumor favorizeaza dezvoltarea celulelor cancerului de prostata care sunt capabile sa prolifereze in mod independent receptorul androgen, promovand astfel progresia tumorii de prostata. Introducere Sindaza inductibilă a oxidului de azot iNOS este exprimată într-o varietate de boli umane inflamatorii prostatita și cum să o lizezi sau cronice, precum și în diferite tipuri de cancer, inclusiv în cancerul de prostată Kröncke et al.

Odată exprimată, iNOS produce cantități mari de oxid nitric NO pentru perioade prelungite de timp care provoacă stres nitrosativ. În glanda prostatică, expresia iNOS este deja detectabilă în neoplazia prostatică intraepitelială de grad înalt precanceroasă Wang și prostatita și cum să o lizezi. În cadrul tumorii, majoritatea celulelor care au colorat pozitiv pentru iNOS sunt celulele canceroase Klotz et al.

Mai mult decât atât, o cantitate variabilă de celule inflamatorii, probabil macrofage, în interiorul și în jurul tumorii exprimă în mod egal iNOS Klotz și colab. Spre deosebire de cancerul de prostată, țesutul prostatic normal, nedetectat normal, precum și țesutul din hiperplazia prostatică benignă nu are un efect negativ sau doar slab pozitiv pentru iNOS Klotz și colab.

Deși expresia puternică a iNOS a fost corelată cu o rată rapidă de proliferare a celulelor canceroase, dediferențierea și predicția cum să îmbunătățiți urinarea cu prostatita slabe Aaltoma et al. Glanda prostatică este prototipul unui organ care reacționează la androgen, deoarece androgenul joacă un rol esențial în reglarea creșterii și diferențierii celulelor epiteliale prostatice normale și maligne.

prostatita și cum să o lizezi

Deoarece celulele tumorilor de prostată depind de androgeni pentru creștere și supraviețuire, ablația androgenică prin orhiectomie, tratamentul anti-androgen sau tratamentul cu hormon de eliberare a hormonului luteinizant sunt terapii standard pentru pacienții care suferă de boală metastatică.

Aceste terapii au prostate cancer discussion forum rezultat un proces activ de moarte celulară programată în majoritatea celulelor prostatice.

Навигация по записям

Din păcate, după un răspuns inițial la terapia de deprivare a androgenului, creșterea cancerului de prostată se resimte, de obicei, într-o formă rezistentă la tratamentul anti-androgen și mulți bărbați mor de hormon prostatita și cum să o lizezi, adică cancer prostatic independent de androgeni Feldman și Feldman, ; Cronauer și colab. Androgenii acționează prin legarea la receptorul androgen ARun factor de transcripție dependent de ligand al superfamiliei receptorului de hormon nuclear steroid care conține două degete de zinc de tip cys4.

Aceste degete de zinc permit AR să recunoască în mod specific elementele sensibile la androgen AREadică secvențe de ADN palindromice în promotorii genelor receptoare de androgeni, cum ar fi probasin sau antigenul specific prostatei PSA. În absența androgenelor, AR se află în principal în citoplasma într-o formă inactivă asociată cu proteinele de șoc termic.

După legarea androgenelor, AR disociază de proteinele de șoc termic, dimerizează și translocă în nucleul în care se leagă la ARE, astfel inducând sau amplificând expresia genei dependentă de androgen. Inițial sa emis ipoteza că AR este redus în celulele tumorilor avansate, refractare hormonală. Cu toate acestea, studii recente demonstrează că cele mai multe tipuri de cancer de prostată refractar la hormoni încă exprimă proteina AR Hobisch și colab.

Deoarece factorii de transcripție a zincului ca AR sunt sensibili la redox și, prin urmare, pot fi ținte moleculare în timpul stresului nitrosativ cauzat de activitatea iNOS, am fost interesați de efectele NO asupra AR. Am constatat că iNOS colocalizează cu colorarea nitrotirozină în biopsii de cancer de prostată, sugerând un iNOS complet activ în cancerul de prostată. In vitro, NO inhibă funcția genomică AR mediată, care nu este datorată diminuării nivelurilor de proteină AR sau a translocării arteriale AR scăzute, dar datorită inhibării activității sale de legare a ADN-ului.

In plus, NO inhiba proliferarea celulelor cancerului de prostata uman AR-pozitiv mult mai eficient decat proliferarea AR-negative, astfel complet androgen-insensibil de celule de cancer de prostata.

Constatările noastre sugerează că stresul nitrosativ contribuie la generarea de celule de prostată capabile să prolifereze independent AR.

Astfel, activitatea iNOS poate juca un rol fatal presupus în progresia cancerului de prostată. În prostatita si nevroza acestor rapoarte nu sunt disponibile date despre activitatea iNOS în cancerul de prostată. Pentru a investiga acest lucru, am analizat mai întâi probele de țesut de la cinci pacienți cu diferite tumori de prostată prin imunohistochimie pentru prezența iNOS.

Niciunul dintre acești pacienți nu a fost supus unui tratament anti-androgen în momentul în care a fost efectuată biopsia. Expresia iNOS a fost găsită în toate tumorile analizate Figura 1adar nivelele de expresie au variat între diferitele tumori. Similar cu rezultatele publicate Klotz et al. În paralel am analizat probele de tumori prostatice pentru prezența nitrotirozinei, o prognostic adenomprostata deadenom a proteinei post-translaționale, ca măsură pentru activitatea iNOS Kröncke et al.

Interesant este faptul că intensitățile expresiei iNOS, precum și modelele de expresie iNOS sunt puternic paralele prostatita și cum să o lizezi colorarea cu nitrotirozină Figura 1b. Colorațiile imunohistochimice pentru iNOS și nitrotirozină au fost specifice, după cum reiese din reacțiile de control negativ, în care anticorpii primari respectivi au fost omisi figurile 1c și d.

Rezultatele noastre indică faptul că iNOS exprimată în cancerul de prostată umană este pe deplin activă și induce stresul nitrosativ. Analiza imunohistochimică a expresiei iNOS și prezența nitrotirozinei în cancerul de prostată primar sau celulele prostatei tratate in vitro cu NO.

În celulele cancerului de prostată, iNOS a și nitrotirozina b au fost coexprimate, așa cum se arată prin colorarea secțiunilor serice de cancer de prostată.

Ca un control negativ, secțiuni seriale suplimentare au fost supuse aceluiași protocol de colorare imunohistochimică, cu excepția faptului că anticorpii primari pentru iNOS c sau nitrotirozină d au fost omise. Rezultatele sunt reprezentative pentru cinci pacienți cu cancer de prostată.

Celulele au fost contracarate cu DAPI fluorescență nucleară albastră. Analiza imunocitochimică a demonstrat prezența nitrotirozinei intracelulare Figura 1fîn timp ce nici celulele netratate Figura 1enici cele tratate cu pM de compus de control DETA Figura 1g nu au prezentat nici o colorare.

Pentru a analiza dacă NR afectează răspunsul genomic transcripțional la androgeni, celulele AR-pozitive de cancer de prostată 22Rv1 au fost cotransfectate tranzitoriu cu o plasmidă reporter condusă de promotor responsabilă de androgeni pGL3E-Pro și un pRL-tk-LUC Vectorul Renilla ca un control intern Tepper et al. Doza dependentă de doză nu inhibă activitatea genei reporter dependente de AR, precum și producția de PSA.

Activitățile genei reporterilor au fost principalele simptome ale prostatitei și activitățile luciferazei licurice au fost normalizate prin activitățile Renilla luciferase. Prostatita și cum să o lizezi au fost efectuate în triplicate. Sunt prezentate rezultatele unui reprezentant din trei experimente independente.

Ulterior, concentrațiile de PSA au fost determinate în supernatanți și normalizate prin numere de celule.

prostatita și cum să o lizezi

Măsurătorile au fost efectuate în cvadruplicate. Este prezentat un reprezentant din două experimente independente. Au fost evaluate și normalizate activitățile de luciferază determinate de promotor prin concentrații de proteine.

stafilococ auriu prostata

Imagine de dimensiune completă NO nu afectează exprimarea proteinei AR sau translocația nucleară indusă de hormoni Inhibarea activității genei reporter dependente de AR prin NO poate fi determinată de scăderea nivelurilor de exprimare ale proteinei AR celulare ca o consecință a fie a sintezei AR scăzute, fie a unei degradări sporite a AR, de exemplu, prin calea proteazomală sau datorită translocării AR nucleare scăzute. Tratamentul cu R a determinat creșterea nivelului AR celular în comparație cu celulele cultivate în absența hormonului Figura 3.

În absența hormonului, activitatea de fluorescență a fost găsită predominant în citoplasmă Figura 4aîn timp ce 10 nM R a indus translocația nucleară maximă a constructului AR-t1EosFP după 6 ore Figura 4b. În plus, experimentele care utilizează celulele cancerului de prostată PC3 transfectate AR-t1EosFP au dat rezultate identice nereprezentate.

Prostatita acută. Cea mai frecventă afecțiune a bărbaților de peste 50 de ani

Efectele NO asupra nivelurilor proteinei AR celulare. Celulele s-au lizat și extractul proteic total a fost analizat prin Western blot folosind anticorpi specifici pentru AR sau pentru beta-actină ca control intern. Imagine de dimensiune completă Efectele NO asupra translocării nucleare mediate de hormoni. După 6 ore, s-au numărat procentele de celule care prezintă fluorescență predominantă citoplasmatică sau nucleară, precum și chiar distribuția de fluorescență nucleară și citoplasmatică.

Imagine de dimensiune completă NO inhibă legarea receptorului androgen la ARE Sa demonstrat că inhibarea activității de legare a ADN a diferiților membri ai superfamiliei receptorului hormon nuclear steroid, de exemplu, receptorul 1a, dihidroxivitamina D3, receptorul retinoid X și receptorul estrogen α Kröncke și Carlberg, ; Garbán și colab.

prostatita și cum să o lizezi

Nicio doză inhibă în mod dependent activitatea de legare a AD la AR. S-au scanat și analizat benzi specifice AR-schimbate pentru abundența lor relativă.

Sunt prezentate rezultatele unui reprezentant din trei până la cinci experimente independente.

vitaprostul ajută adenomul de prostată forte

Incubarea cu concentrații crescătoare de S-nitrosocisteină, un alt donator spontan de NO, precum și experimente care utilizează extracte nucleare ale celulelor cancerului de prostată LNCaP au dat rezultate similare datele nu sunt prezentate. Spre deosebire de LNCaP, care depind de stimulentele androgenice pentru creștere, proliferarea celulelor 22Rv1 este doar slab stimulată de androgeni, cu toate că sunt capabili să se prolifereze în absența androgenilor Sramkoski et al.

După 48 de ore, procentul de celule vii a fost determinat folosind testul bromurii de 3- 4, 5-dimetiltiazolil -2, 5-difenil-tetrazoliu MTT. Aceste rezultate indică faptul că celulele tumorale de prostată AR-negativă, care sunt capabile să prolifereze complet AR în mod independent, sunt mai rezistente la stresul nitrosativ decât celulele tumorale de prostată sensibile la androgen.

Compușii au fost administrați de două ori, la începutul experimentului și în plus 24 de ore mai târziu. Numărul de celule viabile a fost determinat printr-un test colorimetric MTT. Măsurătorile au fost efectuate în opt godeuri paralele.

Cel mai bun moment pentru a trata și preveni prostatita și sistemul genitourinar Cel mai bun moment pentru a trata și preveni prostatita și sistemul genitourinar Masajul prostatei: bun sau rău? În ciuda disconfortului psihologic cu care se confruntă bărbații din procedură, pentru a preveni masajul prostatei este cea mai bună metodă pentru a preveni o astfel de boală neplăcută ca prostatita.

Imagine de dimensiune completă Discuţie Datele epidemiologice au corelat prostatita și infecțiile cu transmitere sexuală cu risc crescut de cancer de prostată și, dimpotrivă, consumul de medicamente antiinflamatorii și antioxidanți cu risc scăzut de cancer de prostată Nelson et al. Astfel, reacțiile inflamatorii cronice sau recurente din cadrul prostatei pot iniția și promova dezvoltarea sau progresia cancerului de prostată. Aici prezentăm faptul că iNOS este pe deplin activă în cancerul de prostată, deoarece colorarea pentru iNOS se corelează cu colorarea nitrotirozinei Figura 1o modificare a proteinei post-translaționale care reflectă o producție crescută de NO.

Această constatare este susținută de un studiu recent care a constatat că nitrația tirozinei în probele de cancer de prostată au fost cultivate timp de 4 zile in vitro Bronte et al. În plus, arată că tratarea celulelor cancerului de prostată cu un donator de NO conduce, de asemenea, la formarea de nitrotirozină intracelulară, conectând astfel datele in vivo cu experimentele noastre in vitro.

Efectele NO în biologia tumorii par a fi complexe și se consideră că au fie efecte stimulative sau supresive asupra creșterii tumorii. La concentrații scăzute, așa cum sintetizează NO sintaza exprimată în mod constitutiv eNOS, nNOSNO pare să acționeze ca o moleculă de semnal care promovează angiogeneza tumorală și stimularea creșterii tumorale, în timp ce la concentrații mai mari, care în mod obișnuit sunt sintetizate prin iNOS, NO induce citostatică sau chiar efectele citotoxice asupra celulelor canceroase care duc la inhibarea creșterii tumorale sau chiar la regresia tumorii.

La bărbați după 40 de prostatite

Cu toate acestea, la concentrații mai mari, NO dezactivează limfocitele T citotoxice infiltratoare de tumori sau chiar induce apoptoza limfocitară, participând astfel la imunosupresia indusă de prostatita și cum să o lizezi, ceea ce poate duce la o creștere tumorală suplimentară pentru revizuiri vezi Thomsen și MilesEkmekcioglu et al.

Transfecția celulelor cancerului de prostată umană cu iNOS și implantarea ulterioară în subcuția șoarecilor nude a suprimat creșterea acestor celule comparativ cu celulele transfectate cu un vector de control Le et al. În plus, sa constatat că terapia genică interferon IFN -beta inhibă creșterea prostatică la șoareci de tip sălbatic, dar nu la șoareci null Olson et al.

Aceste rezultate arată că activitatea iNOS este capabilă să producă activitate antitumorală. Mai mult decât atât, tratamentul celulelor canceroase de prostată cu un donator de NO inhibă legarea ADN-ului constitutiv al represorului transcripțional de zinc Yin Yang 1 hf tratamentul prostatitei în reglarea expresiei Fas și a sensibilității celulelor tumorale la apoptoza indusă de Fas Garbán și Bonavida, ; al. Pentru a elucida rolul NO în progresia cancerului de prostată am investigat efectele NO asupra activității AR în celulele cancerului de prostată.

Am constatat că nu a fost inhibată dependența dozei de transactivare AR Figura 2precum și activitatea de legare a ADN-ului Figura 5.

Efectul inhibitor al NO asupra activității AR este cel mai probabil datorită S-nitrozării reziduurilor de cisteină din cele două degete de zinc de tip cys 4 care sunt esențiale pentru legarea ADN-ului AR.

Stresul nitrosativ poate inhiba sinteza proteinelor celulare. Într-adevăr, tratamentul feritinei proteice de depozitare a fierului cu NO a crescut susceptibilitatea proteolitică față de proteazomul 20S izolat de aproximativ 2, 5 ori Rudeck et al.

Cu toate acestea, stresul nitrosativ nu a dus la scăderea nivelurilor de expresie a proteinei Exacerbarea retenției urinare a prostatitei Figura 3 și nici la translocarea AR nucleară indusă de hormoni Figura 4.

Creșterea cancerului depinde de raportul dintre celulele proliferante și cei care mor. Deoarece androgenul este principalul regulator al acestui raport în prostată, atât stimularea proliferării, cât și inhibarea apoptozei, până în prezent, ablația androgenă este terapia standard pentru tratarea cancerelor de prostată avansate.

Deși acest tratament produce răspunsuri clinice dramatice, ablația androgenului este, în principal, paliativă, deoarece celulele cancerigene independente de androgeni sau hormon-refractar se dezvoltă în timpul tratamentului. Am constatat că NO inhibă proliferarea celulelor cancerului de prostată AR-pozitiv semnificativ mai eficient decât proliferarea celulelor cancerului de prostată AR-negativ figura 6.

Rezultate similare au demonstrat recent cultivarea celulelor carcinomului de prostată în prezența medicamentelor antiinflamatoare nesteroidiene donatoare de NO, cum ar fi nitrosulindacul, NO-ibuprofenul sau NO-aspirina, care, după decolorarea enzimatică, eliberează NO intracelular. Experimentele care utilizează un xenogrefă de prostată umană propagată în șoareci imunodeficienți combinați severă au arătat că, după perioade prelungite de deprivare de androgen, unele celule au reluat creșterea ca cancere inerte androgene Craft prostatita și cum să o lizezi al.

Acest lucru este in concordanta cu ipoteza ca cancerul de prostata refractar hormonal evolueaza prin cresterea unui numar mic de celule canceroase prostatita și cum să o lizezi care se dezvolta la o frecventa scazuta in timpul ablatiei androgenice.

Factorul de creștere epidermică care leagă heparina, care stimulează creșterea tumorilor de prostată, a fost identificat ca un factor care reglează nivelul proteinei AR și promovează un fenotip independent de androgen al celulelor cancerului de prostată Adam și colab.

Cel mai bun moment pentru a trata și preveni prostatita și sistemul genitourinar

Se speculează că NU derivată din iNOS poate fi un alt factor care asigură presiunea de prostatita și cum să o lizezi pentru expansiunea clonală a celulelor tumorale de prostată care prostatita și cum să o lizezi capabile să crească AR independent. În plus, este posibil ca inhibarea mediată de NO a funcțiilor genomice AR să favorizeze activarea căilor de signalizare rapide non-genomice dependente prostatita și cum să o lizezi androgen, un mecanism care recent a fost postulat și pentru receptorul estrogen Garbán et al.

Pe baza observațiilor noastre in vitro, concluzionăm că producția de NO pe termen lung de către iNOS în carcinomul de prostată poate conduce la un micromediu favorabil pentru progresia tumorilor de prostată independente de androgen, explicând astfel corelația dintre expresia iNOS puternică și supraviețuirea săracă a pacienților cu cancer de prostată.

În plus, concluziile noastre prostatita și cum să o lizezi că, pentru chemoprevenția cancerului de prostată, mimetice NO adecvate pot avea un efect aditiv asupra ablației farmacologice androgenice. Imunohistochimie și imunocitochimie Eșantioane bioptice reprezentative pentru cinci pacienți cu cancer de prostată care variază în ceea ce privește gradul și gradul malign au fost utilizate pentru imunohistochimie.

Protocoalele de colorare au fost realizate conform instrucțiunilor de la Abcam. Pe scurt, secțiunile 5 uM de țesuturi înfundate în formă de formalină și parafină au fost deparafinate și spălate cu soluție salină tamponată Tris TBS. Secțiunile au fost contracarate cu hematoxilină, deshidratate cu etanol, curățate cu xilen și încorporate în Eukitt Kindler, Freiburg, Germania. Testele genei Reporter Testele de co-transfecție tranzitorie s-au efectuat așa cum s-a descris Cronauer și colab.

Pe scurt, celulele au fost crescute pe plăci cu 24 de godeuri și transfectate cu plasmidul pGL3E-Probasin reporter luciferază-promotor cu promasină conținând un tratamentul prostatitei cu tinctură de galanga de bp din promotorul genei de probazină de șobolan pozițiile articol pentru tratamentul prostatitei bază până la Transfecția a fost efectuată utilizând FuGene6 Roche Diagnostics Corporation conform instrucțiunilor producătorului.

Activitatea prostatita urina nu merge a fost analizată după o perioadă de incubare de 30 de ore utilizând sistemul de testare a reporterului dual-luciferază Promega. Activitățile de luciferază ale firefly au fost apoi normalizate prin activitățile Renilla luciferază. Activitățile genei proaspăt-reporter au fost evaluate așa cum s-a descris și s-a normalizat la concentrații de proteină.

Nivelurile PSA au fost normalizate în funcție de numerele de celule folosind o cameră Neubauer. S-au detectat benzi imunoreactive cu anticorpi anti-iepure sau anti-șoarece marcat cu peroxidază 1: și vizualizați prin chemiluminiscență îmbunătățită Amersham Pharmacia. Translocația nucleară Celulele cancerului de prostată DU au fost însămânțate în plăci de cultură de țesut cu 12 godeuri și lăsate să adere peste noapte.